茶籽皂素對人卵巢癌細(xì)胞的抑制作用及機(jī)理研究

7閱讀 2019-03-09 08:44 文化

茶皂素是一類齊墩果烷型五環(huán)三萜類糖苷化合物，是茶樹體內(nèi)重要的次級代謝產(chǎn)物之一，主要存在于茶樹根、果實(shí)及花中。已有研究表明茶皂素具有抗氧化、抗炎、抑菌、抗腫瘤等多種生物活性。卵巢癌被認(rèn)為是婦科三大癌癥之一，是一種發(fā)病率和致死率極高的女性疾病。然而，茶皂素對卵巢癌細(xì)胞及其干細(xì)胞抑制活性的研究報(bào)道極少。浙江大學(xué)茶葉研究所2014級博士生賈玲燕同學(xué)在她的博士學(xué)位論文答辯現(xiàn)場，為我們詳細(xì)介紹了三年多的時(shí)間里，她在茶籽皂素對人卵巢癌細(xì)胞的抑制作用及機(jī)理研究，及單體Theasaponin E1對卵巢癌干細(xì)胞的抑制活性方面所取得的研究成果，為茶籽皂素及其單體的活性研究提供了新的證據(jù)。

圖?1.?研究路線

主要研究結(jié)果如下：

1.研究發(fā)現(xiàn)茶籽皂素對卵巢癌細(xì)胞OVCAR-3和A2780/CP70具有顯著抑制活性。且相同濃度下，茶皂素對正常上皮細(xì)胞IOSE-364的毒性明顯低于癌細(xì)胞。茶皂素存在劑量依賴性誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡作用。

2.研究對比了三種茶皂素單體Theasaponin E1、Theasaponin B5、Theasaponin E4抗卵巢癌活性，Theasaponin E1>Theasaponin E4>Theasaponin B5。鑒于Theasaponin E1純度和得率最高且活性最強(qiáng)，選其作為后續(xù)研究的實(shí)驗(yàn)材料。

圖?2.?三種茶皂素單體的結(jié)構(gòu)圖

3. Theasaponin E1可以在劑量和時(shí)間上依賴性抑制A2780/CP70細(xì)胞體外增殖活性和單細(xì)胞克隆能力。一方面通過外凋亡途徑誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡；另一方面通過引起細(xì)胞周期G1期阻滯。

4.研究選取卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞株OVCAR-3和A2780/CP70，ALDH作為干細(xì)胞表面標(biāo)記物，無血清懸浮培養(yǎng)法富集干細(xì)胞，建立了ALDH陽性卵巢癌干細(xì)胞樣群模型。該模型細(xì)胞干細(xì)胞成球能力顯著提高，細(xì)胞遷移能力顯著增強(qiáng)，干細(xì)胞特性蛋白CD44、Nanog、Oct-4，以及抗凋亡蛋白Bcl-2，腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲相關(guān)蛋白MMP-9表達(dá)顯著上調(diào)。采用該模型研究Theasaponin E1對ALDH陽性卵巢癌干細(xì)胞的抑制活性，結(jié)果顯示Theasaponin E1可明顯抑制ALDH陽性卵巢癌干細(xì)胞體外增殖活力，降低無血清條件下成球能力。